由于微生物分布广和体积小的特性，所以在发酵中导致染菌的因素也多种多样。因此，我们无法在实验中及时判断是否染菌，必须经过一段时间的培养才能发现，最后也只能作废，十分影响实验进度及成本。为了确保不会染菌和实验的顺利，在操作前也要严格执行无菌操作。除先前对发酵罐体的灭菌外，在接种时更是要注意。
 

1. 发酵罐的接种量
首先要注意把控接种量，适宜的接种量有助于培养罐内菌种，促进培养基的快速产生，并能减少杂菌生长。但过大过小都会对产物繁殖产生不利影响。
l 接种量过大时，由于发酵罐内的营养和氧气量是一定的，如果菌种过量，会很容易导致发酵罐内溶氧不足，产生大量的代谢物，从而使产物合成受到阻碍；
l 接种量过小时，发酵液中培养物不足，发酵时间延迟，发酵罐的生产效率下降

那么，究竟如何确定接种量呢？其实也就是将接种液体体积和之后的培养液体积。按照规定比例确定即可。

2.发酵罐的接种方式

其次就是如何接种。在大规模工业化生产中，通常是采用发酵罐的压差来进行接种。而对于小型发酵罐则是采用另外两种方式进行接种：火焰接种和注射器接种。
 

注射器接种
步骤1 用酒精棉消毒接种口及周边，操作人员的双手也要进行消毒
步骤2 调节发酵罐罐压（具体操作见下篇）
步骤3 准备好无菌的注射器（提前在超净台吸入菌种液体），然后在无菌操作下，将种子液安全注入发酵罐内。
此种接种方式可以防止菌种与外界空气接触，避免了明火使用，适用于5L以内的小型发酵罐。

今天先带大家了解其中一种接种方式，继续关注霍尔斯（HOLVES），下篇接着讲述。

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