如何正确给生物反应器灭菌?

在进行生物反应实验之前,对生物反应器进行灭菌操作是必不可少的环节。灭菌操作不到位,很容易使生物反应器在运作过程中对发酵产品造成污染,导致较大的损失。因此,找对灭菌的技巧很重要,接下来一起浅论对生物反应器进行灭菌的步骤。

生物反应器
 
STEP 1
取下生物反应器的搅拌电机,平放于桌上,电机接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎,防止灭菌过程脱落,以消除高压蒸汽灭菌时产生的高温蒸汽对电机接口的破坏。

STEP 2
由罐上取下温度传感器,温度传感器不直接接触发酵液,无需灭菌。
 
STEP 3
安装pH电极:
  • pH电极与面板之间有橡胶圈保护;
  • 务必拧紧电极的上下两个固定螺帽;
  • pH电极电缆接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎,防止灭菌过程脱落,影响电极性能;
  • pH电极灭菌前要标定。 

STEP 4
安装DO电极:
  • DO电极与面板之间有橡胶圈保护;
  • 务必拧紧电极的上下两个固定螺帽;
  • DO电极电缆接口处用锡箔纸包好并用皮筋捆扎,防止灭菌过程脱落影响电极性能;
  • DO电极灭菌完后标定;
  • 灭菌前要注意溶氧电极里头的电解液是否还有,没有则要进行添加。
STEP 5
取下消泡或液位电缆线,将消泡或液位电缆插到底,灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去,消泡电极的高度离液面约1.5cm处。

STEP 6
依次拆下生物反应器上冷却水进、出水管和冷凝器上的进、出水管,拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处,以防水流出。

STEP 7
从鲁尔接头处取下空气管,并用软管夹将进气口硅胶管夹紧,硅胶管与空气过滤器跟随玻璃罐一起灭菌,尾气口同样用软管夹夹紧后将硅胶管与尾气过滤器一起放入灭菌锅。

STEP 8
四通补料管口可用硅胶管堵住,亦可连接补料瓶一同灭菌(补料瓶一端连接呼吸阀),依据工况进行处理(若连同补料瓶一同灭菌,进料端必须使用软管夹夹紧)。

STEP 9
收获管、备用管口分别使用软管夹夹紧面板端。

STEP 10
灭菌前需调整好搅拌叶的位置,下部搅拌叶尽量安装在搅拌轴底部,上部搅拌叶调整到所加发酵液的中间位置。

STEP 11
在灭菌前,将生物反应器的六个固定螺帽拧紧。

STEP 12
  • 灭菌前,火焰接种口一定要拧松,防止罐内外压强差太大炸罐;
  • 通常高温高压灭菌121℃,20min(具体时间依培养基成分进行调整);
  • 灭菌结束后,发酵罐体可能温度高,请勿直接触碰,等设备冷却,并佩戴防护手套后再进行操作;
  • 灭菌结束后,立即拧紧火焰接种口,防止染菌。
上述内容就是对生物反应器进行灭菌操作的具体步骤。再次强调:在使用生物反应器之前对其进行灭菌这一步骤至关重要,可以有效防范使用生物反应器时不受微生物污染。




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